Modifikace fosforylace
Výzkum fosforylovaných proteinů a peptidů může lidem pomoci objasnit mechanismus výše uvedeného procesu a dále pochopit podstatu životních aktivit. V posledních letech, s neustálým rozvojem proteomické technologie, se studiu fosforylace proteinů dostává stále větší pozornosti. Mnoho přírodních toxinů a patogenů také uplatňuje své účinky změnou stavu fosforylace intracelulárních proteinů.
Fosforylované polypeptidy se týkají hlavně Ser, Tyr a Thr. Hydroxylová skupina postranního řetězce zbytku je modifikována na kyselý fosfátový polypeptid. Doposud fosforylační modifikace polypeptidů zahrnuje především post-fosforylační metodu a dvě metody syntézy:
Při modifikaci monomerní metodou je obtížné kondenzovat fosforylovanou aminokyselinu s peptidovým řetězcem v důsledku sterické zábrany způsobené větší modifikační skupinou postranního řetězce a následné zavedení aminokyseliny bude obtížnější. Zejména když obsahuje více modifikací fosforylačních míst, bude syntéza extrémně obtížná a konečný produkt má složité složky, je obtížné ho oddělit a má extrémně nízký výtěžek. Pokud je tedy fosforylováno více míst v peptidovém řetězci, lze zvážit post-fosforylační metodu. Hlavním procesem syntézy je selektivní odstranění ochranných skupin postranního řetězce aminokyselin, které mají být značeny po dokončení syntézy polypeptidu. Pro Tyr, Thr Aminokyseliny s nechráněnými postranními řetězci mohou být použity přímo pro reakci. Chránící skupina postranního řetězce při 1% TFA/DCM Za určitých podmínek ji lze kvantitativně odstranit. Během post-fosforylace lze použít bisbenzylfosforamidit. Tetrazol generuje fosforamiditový tetrazolový aktivní meziprodukt, který je připojen k hydroxylové skupině, a poté se oxiduje za podmínek peroxykyseliny za vzniku fosforylové skupiny pro dokončení reakce.
- Poskytujeme služby úpravy fosforylace pSer, pTyr, pThr a D-pSer, D-pTyr, D-pThr.
- Fosforylační modifikace 2 míst, 3 míst, 4 míst a 5 míst mohou být prováděny současně.
Fosforylované peptidy Syntetické pouzdro (Thr(HPO3), Tyr(HPO3), Ser(HPO3) wait)
1. V sekvenci jsou 4 fosforylační místa (xxxpSpTxxxpSxxxpTx), čistota je 95 % a cyklus dokončení je 3 týdny.
